Исследования улучшают мультиплексный мутагенез для повышения эффективности экспериментов по редактированию генома растений

Важные новости

Исследования улучшают мультиплексный мутагенез для повышения эффективности экспериментов в редактировании генома растений» /></p>
<p> Фото: Unsplash/CC0 Public Domain </p>
<p>CRISPR/Cas9 остается самым мощным инструментом для генерации мутаций в геномах растений. Изучение различных комбинаций мутаций значительно увеличило масштабы экспериментальных установок, что потребовало большего пространства для выращивания многочисленных растений.</p>
<p>Исследователи из Центра биологии систем растений ВИБ-УГент усовершенствовали мультиплексный мутагенез, что снижает сложность и стоимость крупномасштабных проектов редактирования генома. Их результаты были опубликованы в <i>The Plant Journal</i>.</p>
<p>Масштабы экспериментов CRISPR/Cas постоянно увеличиваются не только с точки зрения количества мутантов, созданных посредством точного редактирования генома, но и с точки зрения количества генов, которые могут мутировать одновременно. Лаборатория Томаса Джейкобса из Центра биологии систем растений ВИБ-УГент разработала экраны, позволяющие систематически мутировать десятки, сотни или даже тысячи генов одновременно.</p>
<p>Цель состоит в том, чтобы повысить эффективность наследственных мутаций зародышевой линии и, в конечном итоге, снизить сложность и стоимость крупномасштабных проектов редактирования генома.</p>
<p>Для достижения этой цели команда сосредоточилась на двух ключевых аспектах вектора CRISPR/Cas9. дизайн: промотор, управляющий экспрессией Cas9, и сигналы ядерной локализации (NLS), которые направляют белок в ядро. Генотипируя тысячи растений арабидопсиса, они обнаружили, что использование промотора RPS5A для экспрессии Cas9 приводит к самой высокой частоте мутаций и что фланкирование белка Cas9 двусторонним NLS является наиболее эффективной конфигурацией для создания мутаций зародышевой линии.</p>
<p>Сочетание этих двух элементов приводит к самой высокой наблюдаемой эффективности мультиплексного редактирования: 99% растений имеют по крайней мере одну нокаутную мутацию, а более 80% — от 4 до 7 мутаций.</p>
<p>«Это представляет собой значительный прогресс в области генетики растений и предоставляет надежный и эффективный инструмент для исследователей, занимающихся сложной генной инженерией. Что я нахожу особенно интересным, так это эффект NLS. Осмелюсь предположить, что он имел более сильный эффект, чем продвижение », — сказал доктор Томас Джейкобс, руководитель группы Центра биологии систем растений VIB-UGent.</p>
<p>Оптимизация, достигнутая в ходе исследования, значительно снижает сложность и стоимость крупномасштабных проектов редактирования генома в науке о растениях. Если выразить это в цифрах: с их предыдущим вектором для скрининга CRISPR, ищущего все двойные нокауты всего лишь 20 генов, по оценкам, потребовалась популяция примерно в 18 000 растений. С новыми векторами для этого потребуется около 3000 растений.</p>
<p>«Эти оптимизации будут полезны для создания нокаутов более высокого порядка в зародышевой линии Arabidopsis и, вероятно, применимы и к другим системам CRISPR», — сказал Уорд Девелтер. , Кандидат наук. студент и ведущий автор отчета.</p>
<p><strong>Дополнительная информация:</strong> Ward Develtere et al, Постоянное улучшение CRISPR-индуцированного мультиплексного мутагенеза у арабидопсиса, <i> Журнал растений</i> (2024). DOI: 10.1111/tpj.16785 </p>
<p><strong>Информация журнала:</strong> The Plant Journal </p>
<p> Предоставлено VIB (Фландрийский институт биотехнологии) </p>
</div></div><div class=

Новости сегодня

Последние новости